Sérologické markery vírusu hepatitídy B

HBsAg je vonkajšou zložkou vírusu hepatitídy B, objavuje sa v krvi pacientov s akútnou hepatitídou v prodromálnom období ochorenia, pretrváva približne 1 – 4 mesiace a počas zotavovania mizne. Stanovenie HBsAg v krvi je znakom pretrvávania vírusu hepatitídy B. Toto sa pozoruje u pacientov s chronickými ochoreniami pečene. Môžu sa vyskytnúť prípady „zdravého nosičstva“ HBsAg.

HBeAg - je stanovený v krvi pacientov s pozitívnym HbsAg, je detekovaný v skorých štádiách akútnej vírusovej hepatitídy B krátko po objavení sa HBsAg a mizne v čase, keď sa vyvinie klinický obraz.

Keď sa zápalový proces v pečeni stane chronickým, HBeAg zostáva spolu s HBsAg v krvi dlhý čas.

Prítomnosť HBeAg odráža replikačnú fázu vírusu hepatitídy B a koreluje s vysokou aktivitou zápalového procesu v pečeni a nákazlivosťou pacienta.

HBcAg - nie je detekovateľný v krvi, nachádza sa v jadrách hepatocytov. V posledných rokoch sa pomocou imunoelektrónovej mikroskopie zistil HBcAg aj v cytoplazme hepatocytov pacientov.

Po infekcii vírusom hepatitídy B sa počas imunitnej odpovede v krvi objavia protilátky proti vírusovým antigénom.

Ako prvé sa objavujú protilátky proti HbcAg - HBcAb (НbсАgАbо-dy), a to už 2-4 týždne po objavení sa HBsAg. Väčšina protilátok v tomto čase je reprezentovaná triedou IgM (HBcAblgM), ktoré zostávajú v krvnom sére pacientov 6-9 mesiacov. Prítomnosť HBcAblgM naznačuje akútnu alebo chronickú hepatitídu s prebiehajúcou replikáciou vírusu hepatitídy B. O niečo neskôr sa v krvi objavujú HBcAb triedy IgG, ktoré je možné určiť po mnoho rokov. Detekcia HBcAblgG môže naznačovať ako prekonanú, tak aj úplne vyliečenú akútnu vírusovú hepatitídu B, ako aj pretrvávanie vírusu hepatitídy B.

Protilátky proti HBeAg - HBeAb - sa objavujú približne 2 týždne po nástupe akútnej vírusovej hepatitídy B a s poklesom koncentrácie HBeAg zostávajú v krvi 1 až 5 rokov alebo dlhšie. Výskyt HBeAb naznačuje zotavenie pacienta alebo prechod akútnej vírusovej hepatitídy na chronickú, zatiaľ čo replikácia vírusu hepatitídy B sa zastaví alebo výrazne zníži, dochádza k integrácii genómu vírusu hepatitídy B do genómu hepatocytov, čo je sprevádzané znížením aktivity zápalového procesu.

Protilátky proti HBsAg - HBsAb - sa zisťujú 3-5 mesiacov po nástupe akútnej hepatitídy B. V krvi pacienta sa môžu detegovať 5-10 rokov alebo aj dlhšie. Výskyt týchto protilátok naznačuje imunitné zvládnutie infekcie, ale prítomnosť vírusu hepatitídy B v hepatocytoch nie je vylúčená.

Niektorí lekári sa domnievajú, že iba tieto protilátky majú ochranné vlastnosti a poskytujú imunitu voči vírusu hepatitídy B.

Samotný vírus hepatitídy B nemá priamy cytopatický účinok (t. j. samotný vírus neničí hepatocyty); poškodenie pečene sa vysvetľuje výraznou imunitnou odpoveďou tela na zavedenie vírusu do hepatocytu.

V životnom cykle vírusu hepatitídy B sa rozlišujú dve fázy: replikačná fáza a integračná fáza.

Počas replikačnej fázy sa vírus reprodukuje (rozmnožuje). Hepatotropizmus vírusu hepatitídy B, jeho schopnosť preniknúť do hepatocytu, je určený proteínmi vonkajšej membrány pre-S oblasti. Na membránach hepatocytov sa nachádzajú zóny polymerizovaného albumínu zodpovedajúce pre-S1 receptorom.

V dôsledku interakcie pre-S proteínov s ich receptormi na povrchu hepatocytu sa vírus pripojí k hepatocytu. Vo fáze replikácie vírusová DNA preniká do jadra hepatocytu a na ňom, ako na matrici, sa pomocou DNA polymerázy syntetizuje vírusová nukleokapsida, ktorá obsahuje vírusovú DNA, antigény HBcAg, HBeAg, HBxAg. Antigény HBcAg a HBeAg sú hlavným cieľom imunitného systému. Potom nukleokapsida migruje z jadra do cytoplazmy, kde sa replikujú proteíny vonkajšej membrány (HBsAg) a tým sa zostavuje kompletný virión. V tomto prípade sa prebytočný HBsAg, ktorý sa nepoužije na zostavenie vírusu, dostáva do krvi cez medzibunkový priestor. Kompletné zostavenie (replikácia) vírusu končí prezentáciou jeho rozpustného nukleokapsidového antigénu - HBeAg na membráne hepatocytu, kde ho „rozpoznávajú“ imunocyty. Vylučovanie HBeAg do krvi zohráva obrovskú úlohu v ochrane vírusu pred účinkami imunitného systému. Bolo zistené, že cirkulujúci HBeAg potláča obe články imunity. Bunková imunita je inhibovaná znížením syntézy γ-interferónu (hrá kľúčovú úlohu v procese rozpoznávania antigénov vírusu hepatitídy B T-lymfocytmi), humorálna imunita - v dôsledku potlačenia tvorby protilátok B-lymfocytmi. HBeAg je teda schopný vyvolať stav imunotolerancie, čo spomaľuje jeho odstraňovanie z infikovaných hepatocytov.

Schopnosť vírusu hepatitídy B mutovať je teraz preukázaná. Mutácie s rôznou frekvenciou sa môžu vyskytnúť prakticky vo všetkých génoch vírusu hepatitídy B, ale najčastejšie v oblasti génu kódujúceho syntézu HBeAg. V dôsledku mutácie vírus stráca schopnosť syntetizovať HBeAg, čo mu umožňuje uniknúť dohľadu imunitného systému a vyhnúť sa eliminácii. Preto možno predpokladať, že mutáciu vírusu možno považovať za spôsob ochrany pred imunitným systémom a prežitia (zachovania) vírusu v ľudskom tele. Bonino (1994) definuje mutovaný vírus hepatitídy B ako „HBV mínus HBeAg“. Často sa zisťuje pri najzávažnejších ochoreniach pečene spôsobených vírusom hepatitídy B, najmä pri HbeAg-negatívnom variante chronickej hepatitídy, ktorý má nasledujúce znaky:

• absencia HBeAg v krvi za prítomnosti replikačných markerov HBV;
• detekcia HBV DNA v sére a HBcAg v hepatocytoch;
• prítomnosť cytoplazmatických aj jadrových nukleokapsidových antigénov HBV v infikovaných hepatocytoch;
• závažnejší klinický priebeh ochorenia;
• menej výrazná odpoveď na liečbu interferónom v porovnaní s HBeAg-pozitívnou chronickou hepatitídou B.

Preto je vírus typu HBV mínus HBeAg patogénnejší ako divoký typ HBV, pravdepodobne kvôli vyššej cytopatogenite alebo vyššej účinnosti cytotoxických T lymfocytov.

V súčasnosti je viac podložený názor, že „HBV mínus HBeAg“ sa zvyčajne zistí pri absencii tolerancie voči vírusu, zatiaľ čo populácie nemutovaného („divokého“) vírusu prevládajú pri prítomnosti tolerancie voči nemu. Nerozpoznateľnosť mutantného HBV spôsobuje nedostatočnú imunitnú odpoveď, čo mení priebeh a výsledok vírusovej hepatitídy B.

Markery replikačnej fázy vírusu hepatitídy B sú:

• detekcia HBeAg, HBcAblgM (pomer HBcAbG/HBcAbM < 1,2), vírusovej DNA v koncentrácii > 200 ng/l (stanovenej pomocou polymerázovej reťazovej reakcie), DNA polymerázy a pre-S antigénov (charakterizujúcich funkčnú aktivitu albumín-senzitívnych receptorov) v krvi;
• detekcia HBeAg a HBV DNA v hepatocytoch.

U 7 – 12 % pacientov s chronickou vírusovou hepatitídou B je možný spontánny prechod replikačnej fázy do nereplikatívnej fázy (v tomto prípade HBeAg z krvi mizne a objavuje sa HBeAb). Práve replikačná fáza určuje závažnosť poškodenia pečene a nákazlivosť pacienta.

Bolo zistené, že replikácia vírusu hepatitídy B prebieha nielen v pečeni, ale aj v hematopoetických progenitorových bunkách (v kostnej dreni); endoteli; monocytoch, makrofágoch lymfatických uzlín a sleziny, endoteli obličkových ciev; glandulárnom epiteli a fibroblastoch strómy žalúdka a čriev; v stromálnych fibroblastoch semenníkov; neurocytoch a stromálnych fibroblastoch periférnych nervových ganglií; fibroblastoch dermy. V rokoch 1995-1996 bola replikácia vírusu hepatitídy B preukázaná v tkanivách srdca, pľúc, mozgu, pohlavných žliaz, nadobličiek, štítnej žľazy a pankreasu.

Extrahepatálna replikácia vírusu hepatitídy B môže byť príčinou vzniku rôznych extrahepatálnych (systémových) prejavov ochorenia - chronickej generalizovanej infekcie.

Počas integračnej fázy sa fragment vírusu hepatitídy B nesúci gén HBsAg integruje (vloží) do genómu (DNA) hepatocytu, s následnou tvorbou prevažne HBsAg. V tomto prípade sa replikácia vírusu zastaví, ale genetický aparát hepatocytu naďalej syntetizuje HBsAg vo veľkých množstvách.

Vírusová DNA sa môže integrovať nielen do hepatocytov, ale aj do buniek pankreasu, slinných žliaz, leukocytov, spermií a obličiek.

Fáza integrácie je sprevádzaná dosiahnutím klinickej a morfologickej remisie. V tejto fáze sa vo väčšine prípadov vytvára stav imunologickej tolerancie voči vírusu, čo vedie k potlačeniu aktivity procesu a nosičstva HBsAg. Integrácia znemožňuje vírus imunitnej kontrole.

Sérologické markery integračnej fázy:

• prítomnosť iba HBsAg alebo v kombinácii s HBcAblgG v krvi;
• absencia vírusovej DNA polymerázy a DNA vírusu v krvi;
• sérokonverzia HBeAg na HBeAb (t. j. vymiznutie HBeAg z krvi a objavenie sa HBeAb).

V posledných rokoch sa zistilo, že pri hepatitíde B nie je integrácia vírusového genómu s genómom hepatocytov povinná, ale voliteľná. U prevažnej väčšiny pacientov s akútnou hepatitídou B sa nevyvíja. V zriedkavých prípadoch môže dôjsť k chronickej infekcii HBV bez integrácie s genómom infikovaných hepatocytov. U takýchto pacientov sa zaznamenáva prebiehajúca aktívna replikácia HBV.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]