Vírus hepatitídy E

Vírus hepatitídy E (HEV) má guľovitý tvar, priemer 27 – 34 nm, typ symetrie nukleokapsidy je ikozaedrický, nemá vonkajšiu membránu.

Vírus hepatitídy E bol identifikovaný v stolici pacientov, ktorí mali vírusovú hepatitídu typu non-A, non-B enterálnou cestou infekcie, ako aj v stolici experimentálnych zvierat (opic) infikovaných rovnakým materiálom obsahujúcim vírus, pomocou imunitnej elektrónovej mikroskopie (IEM) s použitím séra od rekonvalescentov tejto hepatitídy.

Doteraz sa zistilo, že vírus hepatitídy E má nasledujúce fyzikálno-chemické a biologické vlastnosti.

• Morfologicky je reprezentovaný guľovitými časticami bez obalu; ich povrch má hroty a priehlbiny; vírus sa rozpadá pri vystavení CS CL, zmrazení/rozmrazení a uchováva sa pri teplote -20 °C.
• Priemer vírusových častíc je od 32 do 34 nm.
• Genóm je reprezentovaný RNA s dĺžkou 7,5 kb, jednovláknovou, polyadenylovanou.
• Sedimentačný koeficient je 183 S (pre defektné častice podobné vírusom - 165 S). Vztlaková hustota je 1,29 g/cm3 ^v gradiente KTa/Glu.
• Kultivácia in vitro bola neúspešná.
• Intracerebrálne podanie suspenzie fekálneho extraktu obsahujúceho častice HEV dojčiacim myšiam u nich nespôsobuje ochorenie.

Pomocou molekulárneho klonovania boli zo žlče infikovaných makakov získané veľké množstvá HEV. Bola preukázaná identita vírusových častíc získaných z fekálnych extraktov pacientov s hepatitídou E v rôznych regiónoch sveta (Somálsko, Borneo, Pakistan, Stredná Ázia atď.). Štruktúra genómu HEV bola prakticky dešifrovaná. Analýzou nukleotidových sekvencií a organizácie genómu sa zistilo, že HEV sa líši od pikornavírusov a že nemôže patriť medzi kalicivírusy (caliciviruses), ako sa pôvodne predpokladalo.

Genóm je reprezentovaný jednovláknovou nefragmentovanou pozitívnou RNA so 7500 bázami, ktorá obsahuje tri otvorené čítacie rámce kódujúce vírusovo-špecifické proteíny. Na povrchu viriónu sa nachádzajú priehlbiny pripomínajúce misky (grécky kalich), preto bol vírus pôvodne zaradený do čeľade Caliciviridae (rod Hepavirus). Podrobnejšia štúdia genómu HEV ukázala, že nukleotidová sekvencia jeho RNA je jedinečná a má len určitú podobnosť s vírusom rubeoly.

HEV je v súčasnosti klasifikovaný ako člen čeľade Hepereviridae, rodu Heperevirus, vírusu hepatitídy E.

Antigén(y) HEV - HEV Ag bol identifikovaný na povrchu vírusových častíc pomocou imunitnej elektrónovej mikroskopie, v hepatocytoch imunohistochemickými metódami. U experimentálnych zvierat (makaky a šimpanzy) trpiacich hepatitídou E bol HEV Ag detegovaný v cytoplazme hepatocytov pomocou imunofluorescenčnej metódy pri vrstvení rezov pečene so sérami od tých istých zvierat získanými počas obdobia rekonvalescencie; špecificita HEV Ag bola následne potvrdená v absorpčných štúdiách s použitím rekombinantných proteínov získaných klonovaním genómu HEV.

V imunomorfologických štúdiách opíc infikovaných hepatitídou E boli granulované depozity HEV Ag lokalizované v cytoplazme hepatocytov, pričom granule obsahujúce HEV Ag boli umiestnené náhodne a počet granúl sa v rôznych bunkách významne líšil. Nebola zistená žiadna preferenčná lokalizácia HEV Ag-pozitívnych hepatocytov v žiadnej konkrétnej zóne pečeňového lalôčika. Hepatitída obsahujúca HEV Ag bola konštantne detegovaná pred zvýšením aktivity ALT, potom pretrvávala počas celého obdobia hyperenzýmie a po normalizácii aktivity ALT prakticky vymizla.

Genomické sekvencie HEV boli identifikované v stolici, žlči a krvnom sére pacientov s hepatitídou E u ľudí a experimentálnych zvierat (opíc); humorálna imunitná odpoveď bola študovaná od akútneho štádia ochorenia až po rekonvalescenciu.

Najvyššia koncentrácia častíc HEV bola zistená v žlči infikovaných makakov pred vrcholom aktivity ALT v štádiu infekcie, kedy bol zaznamenaný vrchol prítomnosti HEV Ag v pečeni.

RNA HEV bola nájdená vo vzorkách stolice, žlče a séra infikovaných ľudí a primátov.

Prítomnosť špecifických protilátok (anti-HEV) v krvnom sére pacientov s hepatitídou E u ľudí a experimentálnych zvierat bola stanovená pomocou imunitnej elektrónovej mikroskopie a metódy fluorescenčných protilátok s použitím preparátov častíc HEV alebo pečeňových rezov obsahujúcich HEV Ag ako substrát.

Ďalšie prierezové štúdie izolátov HEV a rekonvalescentných sér získaných od pacientov v rôznych geografických oblastiach, kde sa vyskytli ohniská alebo sporadické prípady hepatitídy E, ako aj častíc HEV a sér získaných od primátov infikovaných týmito izolátmi, nakoniec presvedčili výskumníkov, že existuje jediný vírus (alebo trieda sérologicky príbuzných vírusov) zodpovedný za hepatitídu E na celom svete.

Je znázornená genotypová diverzita HEV. Bolo identifikovaných osem genotypov vírusu, ktorých hlavnými prototypmi boli nasledujúce izoláty: genotyp 1 - izolát HEV z Barmy, 2 - z Mexika, 3 - z USA, 4 - z Taiwanu a Číny, 5 - z Talianska, 6 - z Grécka, 7 - z Grécka (druhý izolát), 8 - z Argentíny.

Bolo preukázané, že v akútnom štádiu hepatitídy E u makakov a šimpanzov cirkulujú v krvnom sére protilátky proti HEV triedy IgM a IgG, zatiaľ čo v sérach rekonvalescenčného obdobia cirkulujú iba protilátky proti HEV triedy...

V mnohých štúdiách boli protilátky IgM proti HEV zistené u 73 % pacientov s hepatitídou E v prvých 26 dňoch od nástupu žltačky; počas obdobia zotavenia boli protilátky IgG proti HEV zistené u 90 % pacientov.

Zdrojom infekcie sú iba ľudia, patogén sa vylučuje stolicou. Mechanizmus infekcie je fekálno-orálny. Hlavnou cestou infekcie je voda kontaminovaná stolicou. Infekčná dávka je výrazne vyššia ako pri víruse hepatitídy A. Náchylnosť na vírus HEV je univerzálna. Epidémie môžu postihnúť desaťtisíce ľudí, ak sa poruší pitný režim, najmä počas sezónnych prác v lete a na jeseň.

Klinicky je hepatitída E miernejšia ako hepatitída A a prechod do chronickej formy nebol zaznamenaný. U 85 – 90 % pacientov je hepatitída E mierna alebo stredne ťažká, často asymptomatická. U tehotných žien je však hepatitída E závažná s úmrtnosťou až 20 %.

Na diagnostiku sa používa imunitná elektrónová mikroskopia; bol navrhnutý testovací systém na detekciu protilátok proti antigénom HEV. Postinfekčná imunita je silná, celoživotná a je spôsobená protilátkami neutralizujúcimi vírus a pamäťovými bunkami imunitného systému. Na špecifickú profylaxiu bola navrhnutá vakcína s celým viriónom a vyvíjajú sa živé a rekombinantné vakcíny.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]